Cô Bạn Còn Trinh Cuối Cùng xoay quanh câu chuyện về Ji-hye, Yeong-joon, Soo-yeong và Mi-na sau khi họ tham gia một bữa tiệc độc thân. Sáng hôm sau, mọi người bắt đầu phát hiện những dấu vết kỳ lạ trên cơ thể của mình và không nhớ gì đã xảy ra trong đêm trước. Để tìm ra sự thật, họ bắt đầu điều tra và phát hiện những manh mối đáng ngờ. Với nghi vấn từ Joon-tae, bí ẩn về mối quan hệ giữa Ji-hye và anh ta dần được hé lộ, khiến cho mọi chuyện trở nên phức tạp hơn bao giờ hết.